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常用的兩種不同原理的蛋白質(zhì)含量測(cè)量方法

更新時(shí)間:2021-10-25  |  點(diǎn)擊率:2239
定氮儀是根據(jù)蛋白質(zhì)中氮的含量恒定的原理,通過(guò)測(cè)定樣品中氮的含量從而計(jì)算蛋白質(zhì)含量的儀器。是食品廠、飲用水廠,藥品檢驗(yàn),肥料測(cè)定中廣泛應(yīng)用,是檢測(cè)種子、乳制品、飲料、飼料、土壤及其他農(nóng)副產(chǎn)品中氮含量的專用儀器。因其蛋白質(zhì)含量測(cè)量計(jì)算的方法叫做凱氏定氮法和杜馬斯燃燒定氮法,故分別被稱為凱氏定氮儀和杜馬斯定氮儀。

凱氏定氮法原理:
凱氏定氮法是測(cè)定化合物或混合物中總氮量的一種方法。即在有催化劑的條件下,用濃硫酸硝化樣品將有機(jī)氮都轉(zhuǎn)變成無(wú)機(jī)銨鹽,然后在堿性條件下將銨鹽轉(zhuǎn)化為氨,隨水蒸氣餾出并為過(guò)量的酸液吸收,再以標(biāo)準(zhǔn)酸滴定,就可計(jì)算出樣品中的氮量。由于蛋白質(zhì)含氮量比較恒定,可由其氮量計(jì)算蛋白質(zhì)含量,故此法是經(jīng)典的蛋白質(zhì)定量方法。

杜馬斯燃燒法原理:

杜馬斯燃燒的方法是將一定量的樣品封裝在鋁舟中,然后在高溫爐中進(jìn)行燃燒;在催化劑和氧氣的環(huán)境中,樣品燃燒后生成的氣體為:CO2、H2O、NOx;這些氣體再經(jīng)過(guò)還原爐后,NOx被還原為N2,而CO2和H2O分離開(kāi);最后氮元素被熱傳導(dǎo)檢測(cè)器(TCD)來(lái)測(cè)量出含量。全部測(cè)量過(guò)程在3分鐘內(nèi)完成。

凱氏定氮法的普遍適用性、精確性和可重復(fù)性已經(jīng)得到了國(guó)際的廣泛認(rèn)可。它已經(jīng)被確定為檢測(cè)食品中蛋白質(zhì)含量的標(biāo)準(zhǔn)方法。